重组类胶原蛋白冻干纤维医疗器械产品注册技术审评报告

一、产品概述

　　(一)产品结构及组成

　　该产品为白色海绵状固体，由重组类胶原蛋白和磷酸氢二钠组成。其中重组类胶原蛋白全长 463 个氨基酸，458-463 为His标签序列，不具有三螺旋结构。该产品玻璃瓶包装，一次性使用，无菌过程生产，货架有效期 2年。该产品使用时用无菌生理盐水溶解。

　　(二)产品适用范围

　　该产品适用于满足该产品说明书中所列条件下，用于面部鱼尾纹真皮组织填充以纠正鱼尾纹。

　　(三)型号/ 规格

　　8 mg/瓶，16 mg/瓶。

　　(四)工作原理

　　重组类胶原蛋白冻干纤维注射后，对皱纹凹陷部位起物理填充和支撑作用。

二、临床前研究概述

　　(一)产品性能研究

　　1.产品技术要求研究

　　产品技术要求研究项目如表1 所示。

　　表1 产品技术要求研究摘要

序号	研究项目	验证结论
1	外观	合格
2	可见异物	合格
3	装量	合格
4	分子量	合格
5	等电点	合格
6	纯度	合格
7	pH值	合格
8	重金属含量	合格
9	微量元素含量	合格
10	总蛋白含量	合格
11	水分	合格
12	炽灼残渣	合格
13	渗透压	合格
14	水溶解性/盐溶解性	合格
15	酵母蛋白质残留量	合格
16	外源性DNA残留量	合格
17	无菌	合格

　　2.产品性能评价

　　一般性要求：外观、可见异物、装量、体外降解、无菌。

　　物理性能要求：水溶解性/盐溶解性、渗透压摩尔浓度、动力黏度、推挤力、热稳定性、冻干纤维网状结构。

　　化学性能要求：鉴别及成分定量：总蛋白含量、纯度、分子量、等电点、氨基酸序列确认、肽段覆盖率、末端氨基酸序列、肽图、巯基和二硫键、消光系数、电泳图型、液相层析图谱;结构表征：氨基酸异质性分析、圆二色(CD)光谱、微量差示扫描量热谱、红外光谱、拉曼光谱;杂质控制相关：重金属总量、微量元素、细菌内毒素、外源性DNA残留量、酵母蛋白质残留量、残余抗生素含量、残余抗生素活性、肽聚糖、碳水化合物结构、水分、炽灼残渣、酸碱度、分子变异体。

　　开展了细胞功能性研究、体内降解和代谢研究。

　　(二)生物相容性

　　该产品属于无源植入器械，通过注射方式植入人体面部真皮层，与人体的组织/骨接触，接触时间>30天。依据GB/T16886系列标准进行生物相容性评价，选择开展的生物学评价终点包括细胞毒性、致敏反应、刺激或皮内反应、材料介导的致热性、急性全身毒性、亚急性全身毒性、亚慢性全身毒性、慢性全身毒性、局部植入反应、遗传毒性、生殖毒性、致癌性。

　　(三)生物安全性

　　该产品采用真菌发酵法制备，申请人提供了生物安全性分析资料。关于免疫原性，申请人提供了免疫原性风险分析及免疫学试验报告。

　　(四)灭菌

　　该产品采用除菌过滤及无菌加工过程控制产品无菌。

　　(五)产品有效期和包装

　　该产品货架有效期为24 个月。申请人提供了货架有效期验证报告，验证方式为实时稳定性试验，包括产品稳定性、包装密封性、模拟运输及模拟运输后产品性能验证资料。

　　(六)动物研究

　　该产品开展了大鼠试验评价局部植入反应及降解情况;采用同位素和生物素标记，开展了大鼠体内降解代谢研究。

三、临床评价概述

　　申请人选择临床试验路径进行临床评价，临床试验的目的为评价用于面部真皮组织填充以纠正鱼尾纹的有效性和安全性。

　　临床试验采用前瞻性、多中心、盲法(评价者盲)、随机对照试验设计。选择的对照器械为胶原蛋白溶液。临床试验在境内4家临床机构开展，本研究计划入组200例受试者(试验组100 例，对照组 100 例)。

　　临床试验的主要有效性评价指标为末次注射后第12周时盲态评价研究者通过照片评价的鱼尾纹皱纹严重程度分级(WSRS)量表评分较基线改善的有效率。次要评价指标包括：首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12周时盲态评价研究者通过照片评价的WSRS量表评分较基线变化值;首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12 周时现场评价者评价的WSRS量表评分较基线变化值;首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第 4周时盲态评价研究者通过照片评价的WSRS量表评分较基线改善的有效率;首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12 周时现场评价者评价的WSRS量表评分较基线改善的有效率;首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第 4、12周时现场评价者评价的全局美容效果分级(GAIS)改善的有效率;首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第 4、12周时受试者评价的全局美容效果分级(GAIS)改善的有效率。安全性评价指标为使用部位的局部反应以及不良事件、使用部位以外的不良事件、实验室检查、生命体征。

临床试验结果：

　　主要评价指标研究结果：

　　(1)FAS集末次注射后第 12周时盲态评价研究者评价的WSRS改善有效率为试验组79.80%，对照组77.00%。两组间有效率差值2.80%，95%CI[-8.63%，14.23%]，下限值高于设定的非劣界值-10%。

　　(2)PPS集末次注射后第 12周时盲态评价研究者评价的WSRS改善有效率为试验组86.81%，对照组79.38%。两组间有效率差值7.43%，95%CI[-3.21%，18.07%]，下限值高于设定的非劣界值-10%。

　　次要评价指标：

　　(1)首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12周时盲态评价研究者通过照片评价的WSRS量表评分较基线变化值;

　　FAS集盲态评价研究者评价的WSRS评分较基线期变化结果如下，首次注射后即刻试验组较基线WSRS变化值-0.84±0.53，对照组-0.90±0.59;第二次注射前试验组较基线WSRS变化值-0.59±0.54，对照组-0.63±0.65;第二次注射后即刻试验组较基线 WSRS变化值-1.24±0.70，对照组-1.23±0.69;末次注射前试验组较基线WSRS 变化值-0.99±0.70，对照组-1.06±0.80 ;末次注射后即刻试验组较基线WSRS 变化值-1.67±0.70，对照组-1.72±0.73;末次注射后第4 周试验组较基线WSRS变化值-1.40±0.79，对照组-1.34±0.85;末次注射后第 12周试验组较基线 WSRS变化值-1.24±0.70，对照组-1.14±0.80。各节点评价结果，组间均无统计学差异(P>0.05)，PPS集与FAS集结论一致。

　　(2)首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12周时现场评价者评价的WSRS量表评分较基线变化值;FAS集现场评价者评价的WSRS评分较基线期变化结果如下，首次注射后即刻试验组较基线WSRS变化值-0.87±0.55，对照组-0.90±0.58;第二次注射前试验组较基线 WSRS变化值-0.69±0.57，对照组-0.68±0.60;第二次注射后即刻试验组较基线WSRS变化值-1.33±0.71，对照组-1.31±0.63;末次注射前试验组较基线 WSRS变化值-1.05±0.73，对照组-1.11±0.76;末次注射后即刻试验组较基线WSRS 变化值-1.80±0.74 ，对照组-1.80±0.75;末次注射后第 4 周试验组较基线 WSRS变化值-1.52±0.79，对照组-1.40±0.83;末次注射后第12 周试验组较基线 WSRS变化值-1.33±0.73，对照组-1.26±0.81。各节点评价结果，组间均无统计学差异(P>0.05)，PPS集与FAS集结论一致。

　　(3)首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第 4周时盲态评价研究者通过照片评价的WSRS量表评分较基线改善的有效率;FAS集盲态评价研究者评价的WSRS评分较基线改善率如下，首次注射后即刻试验组较基线WSRS改善率76.77%，对照组76.00%;第二次注射前试验组较基线WSRS改善率53.19%，对照组54.08%;第二次注射后即刻试验组较基线WSRS改善率86.17%，对照组86.73%;末次注射前试验组较基线WSRS改善率71.74%，对照组72.45%;末次注射后即刻试验组较基线WSRS改善率94.57%，对照组92.86%;末次注射后第4 周试验组较基线WSRS改善率86.96%，对照组82.65%;末次注射后第12 周试验组较基线WSRS改善率 86.81%，对照组79.38%。各节点评价结果，组间均无统计学差异(P>0.05)，PPS集与FAS集结论一致。

　　(4)首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12周时现场评价者评价的WSRS量表评分较基线改善的有效率;FAS集现场评价者评价的WSRS评分较基线改善率如下，首次注射后即刻试验组较基线 WSRS改善率 76.77%，对照组76.00%;第二次注射前试验组较基线WSRS改善率60.64%，对照组 58.16%;第二次注射后即刻试验组较基线 WSRS改善率88.30%，对照组90.82%;末次注射前试验组较基线WSRS改善率72.83%，对照组76.53%;末次注射后即刻试验组较基线WSRS改善率93.48%，对照组92.86%;末次注射后第4周试验组较基线WSRS改善率86.96%，对照组83.67%;末次注射后第12 周试验组较基线WSRS改善率 85.71%，对照组79.38%。各节点评价结果，组间均无统计学差异(P>0.05)，PPS集与FAS集结论一致。

　　(5)首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12周时现场评价者评价的全局美容效果分级(GAIS)改善的有效率;FAS集现场评价者评价的 GAIS量表改善率如下，首次注射后即刻试验组较基线GAIS改善率86.87%，对照组83.00%;第二次注射前试验组较基线 GAIS改善率 68.09%，对照组64.29%;第二次注射后即刻试验组较基线GAIS改善率89.36%，对照组92.86%;末次注射前试验组较基线GAIS改善率77.17%，对照组 82.65%;末次注射后即刻试验组较基线 GAIS改善率95.65%，对照组94.90%;末次注射后第4 周试验组较基线GAIS改善率90.22%，对照组86.73%;末次注射后第12 周试验组较基线GAIS改善率91.21%，对照组85.57%。各节点评价结果，组间均无统计学差异(P>0.05)，PPS集与FAS集结论一致。

　　(6)首次注射后即刻，第二次注射前、注射后即刻，末次注射前、注射后即刻，末次注射后第4、12周时受试者评价的全局美容效果分级(GAIS)改善的有效率;FAS集受试者评价的 GAIS量表改善率如下，首次注射后即刻试验组较基线GAIS改善率92.93%，对照组93.00%;第二次注射前试验组较基线GAIS改善率90.43%，对照组87.76%;第二次注射后即刻试验组较基线GAIS改善率98.94%，对照组96.94%;末次注射前试验组较基线GAIS改善率84.78%，对照组79.59%;末次注射后即刻试验组较基线GAIS改善率98.91%，对照组97.96%;末次注射后第4 周试验组较基线GAIS改善率84.78%，对照组78.57%;末次注射后第12 周试验组较基线GAIS改善率80.22%，对照组73.20%。各节点评价结果，组间均无统计学差异(P>0.05)，PPS集与FAS集结论一致。

安全性评价：

　　(1)使用部位的局部不良事件

　　注射后14天内的局部反应情况：本次临床试验中，试验组99例受试者纳入SS集，对照组100例纳入SS集。共13例受试者在注射后 14天内发生了 18例次局部反应，其中试验组 8例受试者发生12 例次局部反应，发生率8.08%，对照组5 例发生 6例次局部反应，发生率 5.00%。两组间发生率无统计学差异(P>0.05)。试验组8 例受试者发生的局部反应均为轻度，且均判定为器械可能无关;对照组 5例受试者发生的局部反应均为轻度，1 例次(16.67%)判定为器械可能有关，其余判定为可能无关(83.33%)。局部反应持续时间：试验组受试者局部反应平均持续时间 2.17±1.53天，对照组平均持续 4.83±3.76天，两组间无统计学差异。注射后14天仍然存在的局部反应情况：本次临床试验使用部位的不良反应均在注射后14 天内消失，未发生注射后14天仍然存在的局部反应。

　　(2)使用部位以外的不良事件

　　全身性免疫反应：本次临床试验中未发生全身性免疫反应。

　　使用部位外的不良事件：本次临床试验中，共有83 例受试者发生了152 例次使用部位外的不良事件，其中试验组40 例受试者发生78 例次，62.82%为轻度，37.18%为中度，93.59%判定为器械无关;对照组43 例受试者发生74 例次，68.92%为轻度，31.08%为中度，93.24%判定为器械无关。两组间发生率无统计学差异(P>0.05)。

　　(3)实验室检查

　　本次临床试验中，使用器械后出现的异常有临床意义的实验室检查指标，均为疾病史相关，或记录了不良事件。

　　(4)生命体征

　　本次临床试验中，两组间注射后生命体征各项指标变化情况均无统计学差异。

　　(5)严重不良事件：本试验未发生严重不良事件。

四、产品受益风险判定

　　经综合评价，在目前认知水平上，认为该产品上市带来的获益/受益大于风险，为保证用械安全，需在说明书中提示以下信息。

　　(一)注意事项

　　1.产品出现以下情况请勿使用：(1)超出产品有效期;(2)包装破损或打开;

　　2.本产品本身无抗菌作用，因此须预防感染，注射时须严格遵照无菌操作规范进行;

　　3.本产品的使用部位以及周边组织如有感染时，须充分抗感染处理。如发生感染，必须对感染部位进行处理;

　　4.注射后应按医生要求对面部皮肤进行密集养护;

　　5.使用时须避免将本产品直接注射入血管中，以免产品中的胶原蛋白造成血小板凝集而导致局部血管栓塞;

　　6.本产品建议单独使用，禁止与蛋白失活剂同时使用。如需联合用药，应向医师咨询;

　　7.该产品仅限于在国家正式批准的医疗机构中由具有相关专业医师资格的人员，经生产厂家或其委托/指定机构的专业培训后，严格按照产品使用说明书的要求进行使用;

　　8.本产品限一次性使用，未使用完的产品应按医院和环保部门要求进行处理，切勿留存或用于其他患者;

　　9.本产品极少发生过敏反应，一旦发生过敏反应，请立即停止使用;

　　10.本产品用于成人;

　　11.本产品忌口服，应放在儿童接触不到的地方;

　　12.本产品不得用于适用范围批准之外的部位注射(如乳房等);

　　13.本产品保存温度为 2-8℃,请勿置于冷冻库和冰箱出风口处，避免冷冻;

　　14.本产品仅验证了末次注射后12 周有效率，更长时间有效率未知，医护人员应充分告知患者该信息。

　　(二)禁忌证

　　1.本产品不得超适用范围使用;

　　2.本产品不适用于严重过敏体质者，包括(但不限于)对重组蛋白、胶原蛋白过敏的患者;对首次注射过敏者，严禁再次注射;

　　3.本产品不适用于严重自身免疫系统疾病患者;

　　4.对于具有瘢痕疙瘩及异位性皮肤炎、结缔组织病及使用抗凝剂等患者，会有较大几率产生不良反应，医师须审慎评估使用;

　　5.存在感染性、化脓性伤口者禁止注射;

　　6.孕妇、哺乳期及备孕期妇女禁用。

　　(三)使用说明

　　本产品单个疗程包含连续3次注射，每次注射间隔4周。单处单次最大注射剂量为 8mg(1mL)，单次个体总注射剂量不超过16mg(2mL)，单个疗程累计最大剂量不超过48mg (6mL)。本产品多疗程使用的安全性有效性未经验证，仅限单疗程使用，最多注射3次，不得进行多疗程使用。

　　(四)警示

　　本产品仅批准用于单个疗程使用。多个疗程使用、远期使用、与其他注射填充剂等产品联合应用的安全有效性未经验证，相关风险未知。