2025版碳青霉烯耐药基因检测试剂盒创新医疗器械注册技术审批报告

　　在细菌耐药这一充满挑战且形势严峻的特殊战场上，一款由上海伯杰医疗成功研发的名为碳青霉烯耐药基因四联检测试剂盒，以其独特的优势通过国家药监局那严格且具有创新性的审批流程。该款运用极为精准的荧光PCR技术的检测产品，它能够做到在仅仅90分钟这样短暂的时间之内，就快速锁定像KPC、NDM、OXA - 23以及OXA - 48这四大至关重要的耐药基因，并且其灵敏度高达500拷贝/mL，相较于传统药敏试验，大幅提速了整整24小时。此外，经过严谨的临床试验充分证实，其对于重症肺炎患者痰液样本中的耐药基因，在检测时的准确率能够达到93.2%之高，从而有效使得碳青霉烯类抗生素的滥用率成功降低47%，在极为关键的时刻，为那些深受重症感染折磨的患者艰难抢出用于救命的72小时黄金治疗窗。

技术突破双维度

四维基因扫描

　　试剂盒采用双管四标设计：

　　A管狙击手：同时捕捉NDM金属酶+OXA-48苯唑西林酶

　　B管双面镜：并行锁定KPC肺炎克雷伯菌酶+OXA-23不动杆菌克星

　　防误判机制：内参GAPDH监控采样质量(防假阴性)，UDG/dUTP阻断产物污染(防假阳性)

智能抗干扰矩阵

临床效能全景

　　在4家三甲医院完成的1356例重症肺炎患者验证中：

重症监护室实战数据

　　宁波市医疗中心李惠利医院ICU应用显示：

　　呼吸机相关肺炎确诊时间从56小时缩短至8小时

　　碳青霉烯类抗生素使用量下降52%

　　多重耐药菌感染死亡率降低33%

　　2024年避免78例不恰当美罗培南治疗

五步检测全流程

1.样本智能前处理

　　将需取的那1 - 3mL深部痰液朝着那含有着裂解液且盖为紫色的采样管进行注入操作，随后通过涡旋振荡30秒这样的方式，去实现对粘蛋白所形成的屏障予以破除;而一旦遇到的是血性痰这种情况时，则要把启动“红细胞破碎程序”作为操作步骤，具体来讲就是加入那种盖为绿色的溶血缓冲液并让其静置5分钟之后，接着通过离心操作获取上清;需要格外关注的关键点在于，若样本呈现出粘稠的特性，就必须预先添加等体积的痰液消化液，这种消化液是装在透明瓶之中的，随后还要在37℃的环境里对其进行10分钟的孵育操作。

2.核酸极速提取

　　使用BG-NE32配套提取仪：

　　吸取200μL处理液加入深孔板A1

　　加入20μL内参对照液(监控提取效率)

　　运行"痰液专用程序"(15分钟/32样本)

　　洗脱获得80μL核酸(OD260/280=1.8-2.0为合格)

　　遇核酸浓度<10ng/μL触发黄色预警

3.四联PCR扩增

　　按"三区七步法"配制反应体系：

　　阴性对照：2μL生理盐水+18μL反应液

　　阳性对照：2μL工程菌液+18μL反应液

　　待测样本：2μL核酸+18μL反应液

　　分装至A/B双检测管(每管10μL)，严禁气泡产生

4.智能上机检测

　　ABI 7500仪器参数设置：

　　Stage1: 50℃ 2分钟(UDG防污染)Stage2: 95℃ 2分钟(预变性)Stage3: 95℃ 15秒 → 60℃ 45秒(45循环)

　　FAM通道看耐药基因，VIC通道盯内参对照

5.三重结果判读

　　阴性判定：内参Ct≤35且耐药基因无扩增曲线

　　阳性判定：耐药基因Ct≤38且曲线呈"S"型

　　无效结果：内参Ct>35需重新采样检测

　　报告自动生成耐药基因分布热力图(红/黄/绿三色预警)

关键风险警示

绝对禁忌场景

　　采样前使用含氯己定漱口水(抑制PCR扩增)

　　痰液标本室温放置>2小时(核酸降解)

　　肺泡灌洗液等非适配样本类型

操作红线

　　扩增产物开盖操作(污染风险↑90%)

　　反应体系配制未在冰上进行(酶失活)

　　循环数擅自>45(引物二聚体干扰)

特别警示

　　NDM阳性样本需加做mCIM表型验证(防VIM/IMP漏检)

　　OXA-23检出患者需隔离处理(CRAB暴发预警)

　　遇KPC+OXA-48共检立即启动多粘菌素备用方案

　　国家药监局所给出的审批意见明确表示的是，那种能够让重症感染确诊速度加快达到20倍之多的试剂，其检测必须是要在被认定为PCR二级的实验室当中才能够进行的，而且对于每一批次而言都绝对必须运行阴/阳对照这一操作，一旦出现内参失控的状况便需要对采样环节展开追溯;同时该试剂在运输的时候必须要处于 -20℃的冷链条件之下，且在开封之后必须要在2小时的时间范围之内用完。

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