六项泌尿生殖系统感染病原体核酸检测试剂盒医疗器械注册技术审评报告（2025年最新版）

一、产品概述

（一）产品主要组成成分

组分名称	主要组成成分	标示量
STD6 反应酶1	Taq酶	60μL/管×1
STD6引物	引物、dNTPs	770μL/管×1
STD6缓冲液	引物、探针、dNTPs、扩增质控（AC）	1050μL/管×1
STD6 反应酶2	Taq酶	60μL/管×1
STD6内部质控	噬菌体	280μL/管×1
STD6阳性质控1	生殖支原体核酸片段和阴道毛滴虫核酸片段	110μL/管×1
STD6阳性质控2	淋病奈瑟菌核酸片段、沙眼衣原体核酸片段、解脲支原体核酸片段和单纯疱疹病毒Ⅱ型核酸片段	110μL/管×1
稀释液	超纯水	1700μL/管×1

　　注：不同批号试剂盒中各组分不能互换。

（二）产品预期用途

　　本产品用于体外定性检测泌尿生殖道拭子样本中的 6 种病原体核酸，包括沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲支原体(Uu)、生殖支原体、单纯疱疹病毒Ⅱ型、阴道毛滴虫。

　　结合临床表现和其他实验室指标，本产品的检测结果可用于泌尿生殖道相关病原体感染的辅助诊断。

（三）产品包装规格

　　50测试/盒。

（四）产品检验原理

　　本试剂盒采用多重荧光 PCR技术与熔解曲线分析相结合的方法，通过多条特异性引物对沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲支原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒Ⅱ型和阴道毛滴虫的核酸序列中保守区域片段进行 PCR扩增，扩增产物与带有特异性标记的探针结合，不同病原体的产物所对应探针的Tm值不同，通过熔解曲线分析可以鉴别出样本中病原体的种类。

　　本试剂盒包含内部质控(IC)和扩增质控(AC)，内部质控 (IC)监控核酸的提取以及整个反应过程，扩增质控(AC)监控第二步反应过程。

二、临床前研究概述

（一）主要原材料

　　1.主要原材料的选择

　　本试剂盒的主要原材料包括引物、探针、dNTPs、Taq酶、M13噬菌体、扩增质控、阳性质控。均通过外购的方式获得。其中引物、探针、扩增质控和阳性质控由申请人自行设计，由合成公司经过合成和纯化后获得。

　　申请人对主要原材料进行了供应商的选择，通过功能性实验筛选出合格供应商，制定了各主要原材料质量标准并经检验合格。

　　2.企业参考品和质控品的设置情况企业参考品包括阳性参考品、阴性参考品、最低检出限参考品和重复性参考品。

　　阳性参考品 9 份，由试剂盒检测范围内的病原体培养物组成。阴性参考品 9 份，由试剂盒检测范围外不同的病原体培养物组成。重复性参考品 4 份，由试剂盒检测范围内不同浓度水平的病原体培养物组成。最低检出限参考品 9 份，由试剂盒检测范围内的病原体培养物组成。

　　申请人设置了阴性对照，为加入噬菌体的超纯水，阳性对照为含有各靶标病原体的目标基因片段，用于检测过程中试剂和仪器的质量控制。

（二）生产工艺及反应体系研究

　　申请人通过对试剂主要生产工艺的研究，确定了最佳生产工艺。

　　申请人对样本核酸提取试剂、取样量、核酸样本用量进行了研究，同时对引物、探针、Taq酶、dNTPs等的浓度和体积进行了优化，并对反应条件进行优化，包括退火温度、退火时间、变性时间、循环数、荧光补偿等的研究，最终确定了最佳的反应体系。

（三）分析性能评估

　　分析性能评估内容主要包括：准确度、精密度、最低检出限、分析特异性(交叉反应、干扰物质实验、竞争性干扰实验、微生物干扰实验及携带污染实验)、包容性等。申请人提交了有效运行的质量管理体系下生产的 3 批产品，在适用机型上进行的分析性能评估资料。

　　在准确度研究中，申请人使用 3 批试剂检测企业参考品， 结果表明检测阳性参考品P1～P9，检测结果均为相应病原体阳性，阳性符合率100%;检测阴性参考品N1～N9，检测结果均为阴性，阴性符合率100%。

　　在精密度研究中，申请人使用3批试剂进行了批内/批间精密度研究，检测中强阳性、弱阳性和阴性样本，中强阳性、弱阳性样本检测结果均为阳性且批内和批间 Tm值的变异系数(CV，%)均≤2.0%，阴性样本检测结果均为阴性，符合要求。在中间精密度研究中，申请人使用3批试剂，分别对中强阳性、弱阳性和阴性样本进行20天的检测，每批试剂检测每个阳性样本的80个检测结果均为阳性且Tm值的变异系数(CV，%)均≤ 2.0%，阴性样本检测结果均为阴性，试剂盒的中间精密度符合要求。在再现性研究中，申请人使用 3批试剂，在 3个不同的 实验室的 3 台仪器上，对中强阳性、弱阳性和阴性样本进行 5天的检测，每个阳性样本的 75个检测结果均为阳性且Tm值的变异系数(CV，%)均≤2.0%，阴性样本检测结果均为阴性，试剂盒的再现性符合要求。

　　在最低检出限研究中，申请人使用 3 批试剂对试剂盒检测范围内病原体样本进行最低检出限研究，以阳性检出率≥95%时所对应的浓度作为试剂盒的最低检出限，并进行最低检出限验证。经最低检出限研究，本试剂盒检测 6种病原体的最低检出限浓度如下：

病原体（靶标）	拷贝浓度	活性单位浓度
生殖支原体（MG）	150copies/mL	60个/mL
淋病奈瑟菌（NG）	100copies/mL	75CFU/mL
沙眼衣原体（CT）	100copies/mL	60IFU/mL
解脲支原体（Uu）	100copies/mL	100CCU/mL
阴道毛滴虫（TV）	100copies/mL	75cells/mL
单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）	100copies/mL	60TCID50/mL

　　分析特异性包含交叉反应研究、干扰物质研究、竞争性干扰研究、微生物干扰及携带污染研究。

　　在交叉反应研究中，申请人使用3批试剂检测43例交叉反应宫颈拭子样本和43例交叉反应尿道拭子样本，研究显示不在试剂盒检测范围中的人乳头瘤病毒16型、人乳头瘤病毒18型、 人乳头瘤病毒52型、人类免疫缺陷病毒1型、单纯疱疹病毒Ⅰ型、梅毒螺旋体、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、热带念珠菌、人腺病毒5型、巨细胞病毒、化脓性链球菌、水痘-带状疱疹病毒、EB病毒、人肠道病毒71型、人类疱疹病毒8型、乙型溶血性链球菌、杜克雷嗜血杆菌、厌氧肽链球菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球 菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、白色念珠菌、阴道阿托波菌、阴道加德纳菌、人型支原体、细小脲原体、脆弱拟杆菌、惰性乳杆菌、詹氏乳杆菌、格氏乳杆菌、卷曲乳杆菌、羞怯动弯杆菌、克氏动弯杆菌、干酪乳杆菌、人基因组无交叉反应。

　　在干扰物质研究中，申请人使用3批试剂，进行了内源/外源干扰物质研究，对样本中可能含有的干扰物质分别进行评价，研究显示，宫颈拭子样本含有以下干扰物质对检测结果无影响：

　　20μg/mL胆红素、10mg/mL四环素、0.1mg/mL阿奇霉素、10μg/mL螺旋霉素、0.1 mg/mL罗红霉素、0.1 mg/mL米诺环素、1mg/mL磺胺嘧啶、2mg/mL氢化可的松、0.3mg/mL地塞米松、

　　20μg/mL阿昔洛韦、50mg/mL更昔洛韦、60μg/mL盐酸多西环素、0.1mg/mL阿莫西林、20mg/mL甲硝唑片、5mg/mL重组干扰素α2b凝胶、0.15mg/mL左炔诺孕酮片、50mg/mL替硝唑阴道片、15%(v/v)复方黄松洗液、10mg/mL壬苯醇醚栓、174mg/mL保妇康栓、15%(v/v)人体润滑液啫喱、15%(v/v)梵密灵盐水清洗液、10 mg/mL硝酸咪康唑乳膏;尿道拭子样本含有以下干扰物质对检测结果无影响：20μg/mL胆红素、10mg/mL 四环素、0.1mg/mL阿奇霉素、10μg/mL螺旋霉素、0.1mg/mL罗红霉素、0.1 mg/mL米诺环素、1 mg/mL磺胺嘧啶、2 mg/mL 氢化可的松、0.3mg/mL地塞米松、20μg/mL阿昔洛韦、50mg/mL更昔洛韦、60μg/mL盐酸多西环素、0.1mg/mL阿莫西林、20mg/mL甲硝唑片、5 mg/mL重组干扰素α2b凝胶。

　　在竞争性干扰研究中，申请人使用 3 批试剂，对临床上常见检测靶标范围内病原体混合感染的情况，制备同一反应体系内高浓度与低浓度混合样本，检测结果表明高浓度分析物对低浓度分析物检测无竞争性干扰影响。

　　在微生物干扰研究中，申请人研究了15种高浓度水平检测范围外病原体对弱阳性检测靶标的影响，研究结果显示，临床上易合并感染微生物，在高浓度的情况下对试剂盒靶标检测无影响。

　　在携带污染研究中，申请人使用 3 批试剂，交叉检测高浓度阳性样本和阴性样本，检测结果表明高浓度阳性样本可正常检出，阴性样本检测结果均为阴性，不受携带污染的影响。

　　在包容性研究中，申请人使用 3 批试剂，对不同来源和不同亚型/型别的 62 例病原体样本进行了包容性研究。结果表明试剂盒包容性满足性能要求。

（四）阳性判断值研究

　　采用 846例已知病原体背景信息的临床样本进行阳性判断值研究，确定灵敏度和特异性最佳的Tm值范围，得到本产品检测的阳性判断值范围。并使用 406 例临床样本的检测结果对阳性判断值范围进行了验证。

　　本产品的阳性判断值如下表所示：

检测通道	Tm值范围(℃)	病原体（靶标）
ROX （465-610）	59.0～62.0	生殖支原体（MG）
	67.5～70.5	淋病奈瑟菌（NG）
	77.5～80.5	沙眼衣原体（CT）
Cy5 （465-660）	67.0～70.0	解脲支原体（Uu）
	71.5～74.5	阴道毛滴虫（TV）
	77.5～80.5	单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）
FAM （465-510）	71.5～74.5	内部质控（IC）
	57.0～60.0	扩增质控（AC）

（五）稳定性研究

　　申请人对本产品进行了稳定性研究，包括实时稳定性、使用稳定性、运输稳定性等。研究结果表明：试剂盒在-15℃及以下可保存12个月。开瓶后反复冻融次数不应超过5次。

　　在样本稳定性研究中，申请人使用本产品分别对短期储存、 长期储存的样本进行测试，研究结果支持说明书声称。

三、临床评价概述

　　申请人在中国医学科学院皮肤病医院、浙江大学医学院附属妇产科医院、中国福利会国际和平妇幼保健院、广东省人民医院、南昌市生殖医院、广州市花都区人民医院共 6 家临床机构完成了临床试验，有效病例3511例，均为疑似泌尿生殖系统感染的人群，样本类型为泌尿生殖道拭子。临床试验采用试验体外诊断试剂与已上市同类产品或实验室参考方法进行比较研究，确认产品的临床性能。

　　针对生殖支原体，纳入阳性病例255例，阴性病例3256例。与已上市同类产品对比，试验结果显示，阳性符合率100.00%(95%CI:98.52%,100.00%)，阴 性 符 合 率99.82%(95%CI:99.60%,99.92%);

　　针对淋病奈瑟菌，纳入阳性病例390例，阴性病例3121例。与已上市同类产品对比，试验结果显示，阳性符合率99.74%(95%CI:98.56%,99.95%)，阴性符合率99.81%(95%CI:99.58%,99.91%);

　　针对沙眼衣原体，纳入阳性病例457例，阴性病例3054例。与已上市同类产品对比，试验结果显示，阳性符合率99.56%(95%CI:98.42%,99.88%)，阴性符合率99.90%(95%CI:99.71%,99.97%);

　　针对单纯疱疹病毒Ⅱ型，纳入阳性病例 199 例，阴性病例3312例。与已上市同类产品对比，试验结果显示，阳性符合率100.00%(95%CI:98.11%,100.00%)，阴 性 符 合 率99.97%(95%CI:99.83%,99.99%);

　　针对解脲支原体(Uu)，纳入阳性病例265例，阴性病例856例。与已上市同类产品对比，试验结果显示，阳性符合率100.00%(95%CI:98.57%， 100.00%)， 阴性符合率100.00%(95%CI:99.55%，100.00%);

　　针对阴道毛滴虫，临床试验采用试验体外诊断试剂与一代测序进行比较研究，纳入阳性病例257例，阴性病例3254例。试验结果显示，阳性符合率100.00%(95%CI:98.53%，100.00%)， 阴性符合率99.91%(95%CI:99.73%，99.97%)。同时申请人开展了与已上市同类产品的比较，阳性符合率为100.00%(95%CI：95.63%，100.00%)，阴性符合率为100.00%(95%CI：98.17%，100.00%)。

　　综上所述，临床试验结果显示本产品与对比方法的一致性较好，满足技术审评要求。

四、产品受益风险判定

　　本产品根据《YY/T0316-2016医疗器械 风险管理对医疗器械的应用》，对本产品进行风险分析。

（一）受益评估

　　本产品用于体外定性检测泌尿生殖道拭子样本中的 6 种病原体核酸，包括沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲支原体(Uu)、生殖支原体、单纯疱疹病毒Ⅱ型、阴道毛滴虫。

　　结合临床表现和其他实验室指标，本产品的检测结果可用于泌尿生殖道相关病原体感染的辅助诊断。

（二）风险评估

　　申请人对已知危险(源)进行风险评价，按照风险可接受准则判断每个危险(源)的风险是否达到可接受水平，对合理可行降低的风险、不经过风险/收益分析既判定为不可接受的风险采取控制措施，并对具体措施进行实施验证，同时重新对采取措施后的风险进行估计，确认其风险水平是否可接受。但为保证用械安全，基于对主要剩余风险的规避，需要在说明书中提示以下信息：

　　1.本试剂盒检测结果仅供临床参考，不得作为临床感染诊 断的唯一标准。

　　2.当检测样本被检核酸浓度含量低于最低检测限时可能会有假阴性结果，阴性结果仅能说明低于本试剂盒检测限值，不能完全排除感染的可能，此时建议采用其他方法进一步确认。

　　3.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关，实验室环境污染、试剂污染、样本交叉污染会导致假阳性;试剂运输或保存不当造成的试剂检测性能下降会导致假阴性结果。

　　4.本试剂盒采用外源性内部质控，在提取之前加入，用于监测样本提取和 PCR扩增过程，不能监测取样过程。样本采集不合理可能会导致假阴性结果。

　　5.警示及注意事项：产品说明书中介绍了该产品检验方法的局限性及使用中的注意事项。