阴道毛滴虫核酸检测试剂盒医疗器械注册技术审评报告（2025年最新版）

一、产品概述

（一）产品主要组成成分

　　注：不同批号产品的各组分不可以互换。

（二）产品预期用途

　　本产品用于体外定性检测女性阴道拭子样本中的阴道毛滴虫核酸。

　　本产品用于阴道毛滴虫感染的辅助诊断。

　　本产品检测结果仅供临床参考，不作为临床诊断的唯一标准，建议结合患者临床表现和其他实验室检测对病情进行综合评估。

（三）产品包装规格

　　25人份/盒。

（四）产品检验原理

　　本产品采用实时荧光PCR技术，以阴道毛滴虫的repeated targetDNA为靶区域设计引物探针，配以实时荧光PCR反应体系进行检测。反应结束后通过分析各通道的阈值循环数(Ct值)进行结果判定。同时设计了用于监控取样、提取、加样、扩增等过程的内标扩增体系，有效防止假阳性和假阴性发生，以保障检测结果的准确性和特异性。

二、临床前研究概述

（一）主要原材料

　　1.主要原材料的选择

　　本产品制备过程中的主要原材料包括：引物、探针、TaqProHSU+ ProbeMasterMix、假病毒等。这些原材料均为外购方式获得。引物、探针为申请人自行设计后由专业合成公司合成。申请人对主要原材料进行了供应商的选择，通过功能性试验，筛选出最佳原材料和供应商，制定了各主要原材料的质量标准并经检验合格。

　　2.企业参考品和质控品的设置情况

　　企业参考品包括阳性参考品、阴性参考品、检测限参考品和重复性参考品。组成如下：

　　阳性参考品：4份，由阴道毛滴虫病原体培养物组成。

　　阴性参考品：8份，由试剂盒检测范围外的病原体培养物组成。

　　重复性参考品：3份，其中两份由同一阴道毛滴虫阳性临床样本培养物经过Hela细胞液分别稀释至标定浓度组成，第三份由Hela细胞组成。

　　检测限参考品：2份，由不同来源阴道毛滴虫阳性临床样本培养物组成，并经过Hela细胞液分别稀释至标定浓度。

　　试剂盒包含阳性质控品和阴性质控品各 1 支，用于检测过程的质量控制。

（二）生产工艺及反应体系研究

　　申请人通过对试剂主要生产工艺的研究，确定了最佳生产工艺。

　　申请人对样本中可能存在的抑制因素进行了测试，并对样本核酸提取方法进行了研究;同时对引物、探针、TaqProHSU+ProbeMasterMix等原材料的浓度和体积进行了优化;对反应条件进行优化，包括样本采集处理、UNG酶消化时间、变性时间、

　　退火和延伸温度、循环数的选择等，并通过验证最终确定了最佳反应体系。

（三）分析性能评估

　　分析性能评估内容主要包括：准确度、精密度、最低检出限、分析特异性、包容性等。申请人提交了有效运行的质量管理体系下生产的 3 批产品，在适用机型上进行的分析性能评估资料。

　　在准确度研究中，申请人采用六批次试剂盒，对不同浓度的临床阳性样本和阴性样本进行检测，与临床检测结果进行对比，结果表明阳性符合率和阴性符合率均为100%。

　　在精密度研究中，申请人采用三批次试剂盒，对不同浓度的阳性临床样本及阴性样本，进行20天的重复性检测，评估了日内、批内精密度、批间精密度和再现性(不同时间/不同操作人员/不同实验室/不同操作者/不同试剂批次)的精密度。结果显示：Ct值变异系数(CV，%)均<5%，试剂盒精密度良好。

　　在最低检出限研究中，申请人采用三批次试剂盒，检测系列浓度梯度样本，将达到95%阳性检出率的最低浓度水平作为确定的最低检出限，并进行最低检出限验证。最终确定试剂盒的最低检出限为400 copies/mL。

　　分析特异性包含交叉反应研究和干扰物质研究。

　　在交叉反应研究中，申请人采用六批次试剂盒，选取与检测目标核酸序列具有同源性病原体、近源菌、易引起相同或相似的临床症状、采样部位正常寄生或易并发的其他病原体作为交叉反应研究对象。结果表明，针对可能与检测样本产生交叉的其他病原菌：大肠杆菌、解脲支原体1型、解脲支原体3型、 解脲支原体 4 型、白色念珠菌、生殖支原体、阴道加德纳菌、普雷沃菌属、沙眼衣原体D型、单纯疱疹病毒 1型、单纯疱疹病毒2型、腺病毒 3型、巨细胞病毒、人乳头瘤病毒，梅毒螺旋体，表皮葡萄球菌，乙型溶血链球菌，HIV病毒，干酪乳杆菌，均与本试剂盒无交叉反应。

　　在干扰物质研究中，申请人采用三批试剂盒，进行了内源/外源干扰物质研究，对样本中可能含有的干扰物质分别进行评价，包括对内源性物质：血红蛋白(≤30g/L)、白细胞(≤10×109/L)宫颈粘液(≤80%(V/V))，粘蛋白(≤2.5mg/mL)，外源性物质：消糜栓(≤0.3 g/mL)，甲地孕酮片(≤0.5 g/mL)，氟康唑片(≤5 mg/mL)，妇炎洁(≤50%(V/V))，阴道润滑油(50%(V/V))进行验证，检测结果表明：以上浓度的干扰物质均不会影响检验结果的判定。

　　在包容性研究中，申请人对收集的不同来源不同地区的阳性样本进行研究，结果表明试剂盒对不同地区的样本均能正确检出，试剂盒包容性满足要求。

（四）阳性判断值研究

　　在阳性判断值建立过程中，申请人使用 220 例(其中阳性样本63例，阴性样本157例)女性生殖道拭子样本，根据试剂盒检测结果与临床诊断结果比对，通过 ROC曲线分析方法得到 阴道毛滴虫靶标基因的 Cut-off值，使用百分位数法得到内标基因的Cut-off值。申请人使用168例女性生殖道拭子样本(其中阳性样本68例，阴性样本100例)对阳性判断值进行了验证，确定试剂盒靶标和内标的阳性判断值均为37。

（五）稳定性研究

　　申请人对产品实时稳定性、开瓶稳定性、冻融稳定性、运输稳定性以及样本稳定性进行了研究，确定了在各种条件下本产品及样本的有效保存时间。

　　实时稳定性：使用企业参考品对三批试剂按照技术要求检测。结果表明试剂盒在-20℃±5℃条件下，试剂盒有效期为 6个月。

　　此外，申请人对产品的开瓶稳定性、冻融稳定性、运输稳定性以及样本稳定性分别进行了研究。结果显示，产品的性能均能满足产品说明书的声称内容。

三、临床评价概述

　　申请人在荆州市中心医院、湖北省妇幼保健院、湖南中医药大学第一附属医院以及襄阳市第一人民医院共 4 家机构进行了临床试验。入组人群为疑似阴道毛滴虫感染病例。采用试验体外诊断试剂与一代测序、已上市同类产品、镜检以及培养鉴定进行比较研究，确认试验体外诊断试剂的临床性能。样本类型为女性阴道拭子。

　　针对试验体外诊断试剂与一代测序的比较，共入组 507例样本，试验结果显示，二者的阳性符合率为100%(95%CI：97.71%，100%)，阴性符合率为98.25%(95%CI：96.2%，99.2%)，总符合率为98.82%(95%CI：97.44%，99.46%)。

　　针对试验体外诊断试剂与已上市同类产品的比较，共入组221例样本，试验结果显示，二者的阳性符合率为100%(95%CI：96.6%，100%)，阴性符合率为97.32%(95%CI：92.42%，99.08%)，总符合率为98.64%(95%CI：96.09%，99.54%)。

　　针对试验体外诊断试剂与镜检结果的比较，共入组 728例病例，试验结果显示，临床灵敏度为99.58%(95%CI：97.66%，99.93%)，临床特异度为90.82%(95%CI：87.93%，93.07%)。

　　针对与培养鉴定的比较，共入组 108例病例，临床灵敏度为100%(95%CI：89.57%，100%)，临床特异度为98.67%(95%CI：92.83%，99.76%)。

　　上述结果显示，试验体外诊断试剂与对比方法均具有较好的一致性。

　　综上所述，试验体外诊断试剂的临床性能满足技术审评要求。

四、产品受益风险判定

　　本产品根据《YY/T0316-2016医疗器械 风险管理对医疗器械的应用》，对本产品进行风险分析。

（一）受益评估

　　本产品用于体外定性检测女性阴道拭子样本中的阴道毛滴虫核酸，为阴道毛滴虫感染提供一种辅助诊断方法。

（二）风险评估

　　申请人对已知危险(源)进行风险评价，按照风险可接受准则判断每个危险(源)的风险是否达到可接受水平，对合理可行降低的风险、不经过风险/收益分析既判定为不可接受的风险采取控制措施，并对具体措施进行实施验证，同时重新对采取措施后的风险进行估计，确认其风险水平可接受。但为保证用械安全，基于对主要剩余风险的规避，需要在说明书中提示

　　以下信息：

　　1.本产品检测结果仅供临床参考，不作为临床诊断的唯一 标准，建议结合患者临床表现和其他实验室检测对病情进行综合评估。

　　2.警示及注意事项：该试剂盒说明书中明确了该试剂盒检查方法的局限性及使用中的注意事项。